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關于熒光定量PCR試劑盒的一些介紹

點擊次數:784 更新時間:2021-05-10
 
  熒光定量PCR試劑盒中的PCR:聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。它能在一個試管內將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數小時內擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷。可從一根毛發、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的DNA供分析研究和檢測鑒定。PCR技術是生物醫學領域中的一項革命性創舉和里程碑。
  熒光定量PCR試劑盒基本原理:先用隨機引物將RNA反轉錄成cDNA,然后設計特異性的引物和熒光探針(TaqMan探針),進行熒光定量PCR檢測。TaqMan探針是一種寡核苷酸探針,它設計為與日標序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團連接在探針的5’末端,而淬滅劑則在3’末端。當完整的探針與日標序列配對時,熒光基材發射的熒光因與3’端的淬滅劑接近而被淬滅,但在進行延伸反應時,qTaq聚合酶的5’外切酶活性將探針進行酶切,使得熒光基團與淬滅劑分離,熒光強度得到檢測。隨著擴增循環數的增加,釋放出來的熒光基團不斷積累,因此熒光強度與擴增產物的數量呈正比關系。
  熒光定量PCR試劑盒產品特點:
  1.無需優化反應和循環條件,快速構建反應體系。
  2.高靈敏度檢測,即使是低豐度的轉錄本也可以檢測。
  3.試劑盒確保DNA或cDNA模板的準確定量,適用于各種類型熒光定量PCR儀。
  4.整合熱啟動酶的*PCR系統,*限度的避免非特異性擴增。
 
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